紫(zǐ)外分析儀(yí)是熒光的應用，熒光(guāng)是(shì)什(shí)麼(mó)呢? 了(liǎo)解(jiě)下(xià)什(shí)麼是熒光，熒(yíng)光(guāng)又作"螢光(guāng)"，是(shì)種光致發(fā)光(guāng)的(dí)冷發光現象(xiàng)。當某種常溫物(wù)質經某種波長(cháng)的入(rù)射(shè)光(通(tōng)常(cháng)是紫(zǐ)外綫或X射綫)照射，吸收光(guāng)能後(hòu)入激(jī)發(fā)態(tài)，並且(qiě)立(lì)即退激(jī)發(fā)並發出比(bǐ)入射光的(dí)的波長(cháng)長(cháng)的(dí)出射光(guāng)(通常波長在可見光波段(duàn));而(ér)且旦停(tíng)止(zhǐ)入射(shè)光(guāng)，發(fā)光(guāng)現(xiàn)象(xiàng)也(yě)隨之立(lì)即消失(shī)。具(jù)有(yǒu)這(zhè)種性質(zhì)的出(chū)射光就被稱之為(wéi)熒(yíng)光。 知道(dào)了什(shí)麼是(shì)熒(yíng)光(guāng)，顧名(míng)思(sī)義(yì)就能想到(dào)什麼(mó)是熒光。熒光(guāng)是某些(xiē)物質受定(dìng)波(bō)長(cháng)的(dí)光(guāng)激(jī)發後，在短(duǎn)時間內(10-8秒(miǎo))會(huì)發(fā)射(shè)出波長大(dà)於激發波長(cháng)的光，這(zhè)種(zhǒng)光稱為(wéi)熒(yíng)光。這發(fā)光現象在(zài)各方(fāng)麵的應用及有(yǒu)關(guān)的方(fāng)法(fǎ)稱為(wéi)熒(yíng)光(guāng)(fluorescent technique)。
物(wù)質經(jīng)過(guò)紫外(wài)綫(xiàn)照(zhào)射(shè)後發出熒(yíng)光的(dí)現象可分為兩種(zhǒng)情況，*種(zhǒng)是自發熒(yíng)光(guāng)，如(rú)葉綠素，血(xiě)紅素(sù)等(děng)經(jīng)紫外綫照射(shè)後(hòu)，能發出紅(hóng)色的熒光(guāng)，稱為自發熒(yíng)光;二種是誘(yòu)發熒光，即物體經熒(yíng)光染料染色後(hòu)再通(tōng)過紫(zǐ)外(wài)綫(xiàn)照射發(fā)出(chū)熒(yíng)光，稱為(wéi)誘發(fā)熒(yíng)光。紫(zǐ)外(wài)分(fēn)析儀圖片(piàn)
熒光在(zài)生(shēng)物(wù)化學及(jí)分子生物學研究(jiū)中應用主要包(bāo)括以下幾個(gè)方(fāng)麵(miàn):
1，物(wù)質的(dí)定(dìng)性:不同(tóng)的熒光物(wù)質有不(bù)同的激(jī)發光(guāng)譜和發(fā)射光譜，因此可用熒(yíng)光(guāng)行物(wù)質的(dí)鑒別。與(yǔ)吸收光(guāng)譜(pǔ)法相(xiāng)比(bǐ)，熒(yíng)光法具有更(gēng)的選擇(zé)性。
2，定(dìng)量測(cè)定(dìng):利用在較低(dī)濃(nóng)度下熒(yíng)光(guāng)強度與(yǔ)樣(yàng)品濃度成(chéng)正比(bǐ)這關(guān)係可(kě)以定(dìng)量(liáng)分析樣品(pǐn)中(zhōng)熒光(guāng)組分的含量，常用於測定氨(ān)基(jī)酸，蛋白質(zhì)，核(hé)酸的含(hán)量。熒(yíng)光定量(liáng)測定的個(gè)優(yōu)點是(shì)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)，例如(rú)維生素B2的測定*可達1毫(háo)微(wēi)克/毫(háo)升，這(zhè)優(yōu)點(diǎn)使測定(dìng)時(shí)所需要樣品量(liáng)大(dà)大減(jiǎn)少(shǎo)。 這種(zhǒng)定量測定(dìng)方法(fǎ)還可應用(yòng)於酶催化(huà)的(dí)反(fǎn)應，隻(zhī)要反應前後有熒(yíng)光強度(dù)的變化，就(jiù)可(kě)用來測定酶的(dí)含量及(jí)酶反應的速率(shuài)等。
3，研究生物大(dà)分子的物(wù)理化(huà)學(xué)性(xìng)及(jí)其分(fēn)子的結構和構象(xiàng):熒光(guāng)的激發光譜，發(fā)射光(guāng)譜(pǔ)，量(liáng)子產率和熒光壽(shòu)命等參數(shù)不僅和(hé)分子內熒光(guāng)發色基團(tuán)的本(běn)身結構有(yǒu)關，而(ér)且(qiě)還強烈(liè)地依賴於發色團周(zhōu)圍(wéi)的環境，即對(duì)周圍環境(jìng)十分敏(mǐn)感(gǎn)。利用(yòng)此點(diǎn)可(kě)通過(guò)測(cè)定上(shàng)述有(yǒu)關熒(yíng)光參數(shù)的變化來研究熒(yíng)光(guāng)發(fā)色團(tuán)所在(zài)位的(dí)微環境的(dí)征(zhēng)及其(qí)變化(huà)。在此(cǐ)研究(jiū)中(zhōng)，除了(liǎo)利(lì)用(yòng)生(shēng)物(wù)大分子本身具有的(dí)熒(yíng)光發(fā)色(sè)團(如(rú)色(sè)氨(ān)酸(suān)，酪氨(ān)酸，鳥苷酸(suān)等，此(cǐ)類熒光稱為內(nèi)源熒(yíng)光)以(yǐ)外(wài)，可將些(xiē)殊的熒光(guāng)染料(liào)分子共價地(dì)結(jié)合或吸附在(zài)生物(wù)大分子的某位，通過(guò)測定該染料分子的(dí)熒光性變化來研(yán)究生(shēng)物(wù)大(dà)分(fēn)子，這種(zhǒng)染(rǎn)料分(fēn)子(zǐ)被(bèi)稱為"熒(yíng)光探(tàn)針(zhēn)"，它們發(fā)出的(dí)熒光(guāng)般(bān)稱(chēng)為外源熒光。熒(yíng)光探針的(dí)應(yīng)用，大(dà)大地(dì)開拓(tuò)了(liǎo)熒光(guāng)在分(fēn)子生物學(xué)中的應(yīng)用範(fàn)圍(wéi)。
4，利用(yòng)熒光(guāng)壽命(mìng)，量(liáng)子產率等參(cān)數(shù)可以研究生(shēng)物大(dà)分(fēn)子中(zhōng)的(dí)能量轉移現(xiàn)象:通過該(gāi)現(xiàn)象的研究(jiū)，可(kě)以(yǐ)獲(huò)得(dé)生(shēng)物(wù)大(dà)分子內的(dí)許多信息。
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