紫外(wài)分(fēn)析儀是熒光的應用，熒(yíng)光(guāng)是什麼(mó)呢(ní)? 了解下(xià)什麼是熒(yíng)光，熒光(guāng)又作(zuò)"螢(yíng)光(guāng)"，是(shì)種光(guāng)致(zhì)發光(guāng)的(dí)冷發光現象(xiàng)。當(dāng)某(mǒu)種(zhǒng)常溫(wēn)物(wù)質經某種(zhǒng)波(bō)長(cháng)的入射(shè)光(通常是紫外綫或X射(shè)綫(xiàn))照(zhào)射，吸收(shōu)光能後入激發態，並且立(lì)即(jí)退(tuì)激發並發出比入(rù)射(shè)光的的(dí)波(bō)長長(cháng)的出射光(guāng)(通常波(bō)長(cháng)在可見(jiàn)光(guāng)波(bō)段);而(ér)且旦(dàn)停止(zhǐ)入射光，發光現(xiàn)象也隨之立即(jí)消(xiāo)失。具有(yǒu)這種(zhǒng)性(xìng)質的(dí)出(chū)射(shè)光就被稱(chēng)之為熒光(guāng)。 知(zhī)道了(liǎo)什麼是熒(yíng)光(guāng)，顧(gù)名思(sī)義就(jiù)能(néng)想到(dào)什麼是(shì)熒光(guāng)。熒(yíng)光是某些(xiē)物質受(shòu)定(dìng)波長(cháng)的(dí)光(guāng)激發後，在(zài)短(duǎn)時間(jiān)內(nèi)(10-8秒)會(huì)發(fā)射(shè)出(chū)波(bō)長(cháng)大(dà)於激發(fā)波長的光，這種(zhǒng)光稱(chēng)為(wéi)熒光(guāng)。這發(fā)光現(xiàn)象(xiàng)在各方麵的(dí)應用(yòng)及(jí)有(yǒu)關的方法稱(chēng)為(wéi)熒光(guāng)(fluorescent technique)。
物(wù)質經(jīng)過紫(zǐ)外(wài)綫(xiàn)照射(shè)後發出(chū)熒光的(dí)現象可分(fēn)為兩(liǎng)種情(qíng)況，*種是(shì)自發熒光，如(rú)葉(yè)綠(lǜ)素，血(xiě)紅(hóng)素等經(jīng)紫(zǐ)外(wài)綫照(zhào)射(shè)後(hòu)，能(néng)發出(chū)紅色(sè)的熒光，稱為自發熒光;二種是誘發熒(yíng)光(guāng)，即物(wù)體經熒光染(rǎn)料(liào)染(rǎn)色後(hòu)再(zài)通過紫(zǐ)外綫照(zhào)射發(fā)出(chū)熒(yíng)光(guāng)，稱為誘(yòu)發熒光(guāng)。
熒光(guāng)在生物化(huà)學(xué)及分(fēn)子生物學(xué)研究(jiū)中應(yīng)用主要包(bāo)括以下(xià)幾(jī)個(gè)方麵:
1，物(wù)質的定(dìng)性(xìng):不(bù)同的熒光物質(zhì)有(yǒu)不同(tóng)的(dí)激(jī)發光(guāng)譜和發(fā)射光譜，因此可(kě)用熒光行物(wù)質的鑒別。與(yǔ)吸收(shōu)光譜法(fǎ)相比，熒(yíng)光(guāng)法具有更(gēng)的(dí)選擇性。
2，定量(liáng)測(cè)定(dìng):利用在(zài)較(jiào)低(dī)濃(nóng)度(dù)下(xià)熒光(guāng)強度(dù)與樣品濃(nóng)度(dù)成(chéng)正比這(zhè)關係可(kě)以定量(liáng)分析(xī)樣(yàng)品中熒光組(zǔ)分(fēn)的含量，常用於測定氨(ān)基(jī)酸，蛋(dàn)白質(zhì)，核(hé)酸的含(hán)量(liáng)。熒(yíng)光定(dìng)量測定的個(gè)優(yōu)點是(shì)靈敏(mǐn)度(dù)，例(lì)如(rú)維(wéi)生(shēng)素B2的測(cè)定*可(kě)達1毫微克(kè)/毫(háo)升，這優點使(shǐ)測(cè)定(dìng)時(shí)所需(xū)要樣(yàng)品(pǐn)量(liáng)大大減少(shǎo)。 這(zhè)種定(dìng)量測定方(fāng)法(fǎ)還可應(yīng)用於(yú)酶催(cuī)化(huà)的(dí)反(fǎn)應，隻(zhī)要反應前後有熒(yíng)光(guāng)強(qiáng)度(dù)的變化，就(jiù)可(kě)用來(lái)測(cè)定酶的(dí)含(hán)量(liáng)及酶(méi)反應的(dí)速(sù)率等。
3，研(yán)究(jiū)生(shēng)物大(dà)分(fēn)子的物(wù)理化(huà)學性及其分(fēn)子(zǐ)的結(jié)構(gòu)和構象(xiàng):熒光的(dí)激發(fā)光(guāng)譜，發(fā)射(shè)光譜，量(liáng)子(zǐ)產率和熒光(guāng)壽命等參數不(bù)僅和分(fēn)子內(nèi)熒(yíng)光發(fā)色(sè)基團的本(běn)身結(jié)構有(yǒu)關，而且還(huán)強烈地依賴(lài)於發色(sè)團(tuán)周(zhōu)圍的(dí)環境，即(jí)對(duì)周圍環(huán)境十分敏感。利用(yòng)此(cǐ)點(diǎn)可(kě)通過測定上(shàng)述有關熒光參(cān)數(shù)的(dí)變化來研究熒光發色團所在位(wèi)的(dí)微(wēi)環境(jìng)的征(zhēng)及其(qí)變化(huà)。在此研究中，除(chú)了利(lì)用生物大分子(zǐ)本身具有(yǒu)的熒光(guāng)發色(sè)團(如色(sè)氨(ān)酸(suān)，酪氨(ān)酸，鳥苷酸(suān)等，此類熒光(guāng)稱(chēng)為(wéi)內源(yuán)熒光(guāng))以(yǐ)外，可(kě)將(jiāng)些殊的熒光染(rǎn)料分(fēn)子(zǐ)共(gòng)價(jià)地結(jié)合(hé)或吸(xī)附在生物(wù)大分(fēn)子的某位(wèi)，通(tōng)過(guò)測定該(gāi)染(rǎn)料(liào)分子(zǐ)的熒光(guāng)性(xìng)變化(huà)來研究(jiū)生物大(dà)分(fēn)子，這種(zhǒng)染料(liào)分(fēn)子(zǐ)被稱為(wéi)"熒光(guāng)探(tàn)針(zhēn)"，它們發出(chū)的(dí)熒光般稱(chēng)為外源熒(yíng)光(guāng)。熒光(guāng)探針的(dí)應用(yòng)，大大地(dì)開(kāi)拓(tuò)了熒(yíng)光在分子(zǐ)生物(wù)學(xué)中的(dí)應用範(fàn)圍。
4，利用熒(yíng)光壽命，量子(zǐ)產(chǎn)率等參(cān)數可以(yǐ)研究生(shēng)物大(dà)分子(zǐ)中的能量(liáng)轉(zhuǎn)移(yí)現象:通過該現(xiàn)象(xiàng)的(dí)研(yán)究(jiū)，可以獲得生物(wù)大分子內(nèi)的許(xǔ)多信(xìn)息。
以往人們(mén)常用(yòng)熒(yíng)光偏振(zhèn)做標來研究生物大分子動(dòng)力(lì)學。人們趨(qū)於用熒(yíng)光偏(piān)振隨(suí)時間的衰減(jiǎn)來(lái)研究(jiū)這些問(wèn)題。在這種(zhǒng)方(fāng)法中，激(jī)發光(guāng)不是連(lián)續(xù)的麵偏振(zhèn)光，而(ér)是偏(piān)振(zhèn)的(dí)光(guāng)脈衝，因(yīn)此測得的(dí)F∥和F是在兩(liǎng)個不同方向(xiàng)上偏(piān)振的熒(yíng)光隨時間(jiān)的衰減，它既(jì)和熒光壽(shòu)命τ有(yǒu)關，又與分(fēn)子在溶液中的(dí)運動有(yǒu)關，因(yīn)此(cǐ)常(cháng)表(biǎo)示(shì)為F∥(t)和F⊥(t)。由(yóu)它(tā)們可(kě)得相(xiāng)當重(zhòng)要(yào)的物理(lǐ)量--各向(xiàng)異性參數A(t)。由(yóu)A(t)可推測(cè)生物大分子的(dí)形(xíng)狀(zhuàng)，分子(zǐ)轉(zhuǎn)動弛豫時間(即從(cóng)個(gè)定(dìng)向的狀態(tài)到(dào)個(gè)無定(dìng)向(xiàng)狀(zhuàng)態所要(yào)的(dí)時間)，而(ér)可以(yǐ)推知生(shēng)物大(dà)分(fēn)子的大小，分子在溶(róng)液(yè)中(zhōng)的(dí)轉動角度(dù)和(hé)時間之(zhī)間(jiān)的函數(shù)關係(xì)。由(yóu)這些結(jié)果可以研(yán)究分子(zǐ)之間(jiān)的相(xiāng)互(hù)作(zuò)用，分子間結合的(dí)緊(jǐn)密(mì)程(chéng)度(dù)，蛋白質，核(hé)酸分子(zǐ)的(dí)解(jiě)聚(jù)程(chéng)度(dù)等(děng)等(děng)。
另外，熒光在(zài)免(miǎn)疫學(xué)中亦有廣(guǎng)泛的應用。zui重要的就是(shì)熒光抗(kàng)體(tǐ)法。將某些熒光染(rǎn)料與血清抗體(tǐ)相(xiāng)結(jié)合(hé)，這(zhè)種標記的(dí)抗體(tǐ)仍可(kě)地與(yǔ)相(xiāng)應抗(kàng)原(yuán)發(fā)生結合，形成(chéng)的復(fù)合(hé)體具有(yǒu)熒光性，從而可(kě)以(yǐ)確(què)定抗(kàng)原或抗體的(dí)存在(zài)及(jí)其含(hán)量。
利用(yòng)熒(yíng)光的紫外分析儀(yí)主要是(shì)物質(zhì)的(dí)定性方麵(miàn)的應(yīng)用，包括(kuò):
⑴在實驗(yàn)作中檢測(cè)，許多(duō)主要物質(zhì)如蛋白質，核苷酸等(děng)。
⑵在(zài)藥(yào)物(wù)和(hé)研究中(zhōng)，可(kě)用(yòng)來(lái)檢查(chá)激素生物鹼，維生素等各(gè)種(zhǒng)能(néng);產生熒光(guāng)藥量，別適宜作(zuò)薄層(céng)分析(xī)和(hé)紙(zhǐ)層(céng)分(fēn)析(xī)斑點(diǎn)和(hé)檢測。
⑶在染料(liào)塗料橡膠(jiāo)，石(shí)油等化學行業中(zhōng)，測(cè)定各種(zhǒng)熒(yíng)光(guāng)材料(liào)，熒光示(shì)劑(jì)及(jí)添加劑(jì)，鑒別不同(tóng)種類的原(yuán)油和(hé)橡膠製品。
⑷紡織化(huà)學纖維(wéi)中(zhōng)可測定(dìng)不(bù)同種(zhǒng)類的(dí)原(yuán)材料。如(rú)羊毛，真絲(sī)人纖維，棉花，合成纖維(wéi)，並可檢(jiǎn)查(chá)成量(liáng)。
⑸在糧(liáng)油(yóu)，蔬(shū)菜(cài)，食品(pǐn)，可(kě)用於(yú)檢查毒素(如(rú)黃曲黴(méi)素等)，食(shí)品(pǐn)添加劑(jì)，變質的(dí)蔬菜，水果(guǒ)，可可豆，巧(qiǎo)克力，脂(zhī)肪(fáng)，蜂(fēng)蜜，糖蛋等的質量。
⑹在(zài)地(dì)質(zhì)，考(kǎo)古等(děng)，可起到(dào)發現各(gè)種礦(kuàng)物質，判(pàn)別文物化(huà)石的真偽(wěi)。
⑺在(zài)gongan可檢(jiǎn)查紋，測定(dìng)密(mì)寫字(zì)跡等(děng)。
△ 在(zài)實驗作中它是(shì)檢(jiǎn)測(cè)許多主(zhǔ)要(yào)物質如蛋(dàn)白質，核苷酸等(děng)。
△ 在(zài)藥物(wù)和(hé)研究中，可用來檢查(chá)激素生(shēng)物(wù)鹼，維生素等(děng)各(gè)種 能產生螢(yíng)光(guāng)藥品的(dí)質量，它別適(shì)宜作薄層分析(xī)，紙(zhǐ)層(céng)分(fēn)析斑點(diǎn)和 檢測。
△ 在染料塗料(liào)橡(xiàng)膠，石油等化(huà)學行業中，測定各(gè)種(zhǒng)螢(yíng)光(guāng)材料，螢光示劑及添加(jiā)劑， 鑒(jiàn)別(bié)不同(tóng)種(zhǒng)類的(dí)原(yuán)油(yóu)和(hé)橡膠製品(pǐn)。
△ 在(zài)紡織化學纖維(wéi)中(zhōng)可以用(yòng)於測定不(bù)同種(zhǒng)類的(dí)原(yuán)材料如(rú)羊毛，真絲(sī)人纖維，棉花合成纖(xiān)維(wéi)，並(bìng)可檢查(chá)成(chéng)量。
△ 在(zài)糧(liáng)油(yóu)，蔬(shū)菜(cài)，食(shí)品(pǐn)可用於檢查毒素，(如黃(huáng)曲黴素等)食(shí)品添(tiān)加(jiā)劑(jì)，變(biàn)質的蔬菜(cài)，水果，可(kě)可豆肪(fáng)，巧(qiǎo)克(kè)力，脂(zhī)肪，蜂(fēng)蜜，糖(táng)，蛋 00等的質量(liáng)。
△ 在(zài)地質(zhì)，考(kǎo)古(gǔ)等(děng)可起(qǐ)到(dào)發現各(gè)種礦(kuàng)物(wù)質(zhì)，判(pàn)別文物化石(shí)的真偽。
△ 在(zài)gongan可(kě)檢(jiǎn)查痕測定，密寫(xiě)字跡等。
當(dāng)前位(wèi)置(zhì)：